Evaluación de la capacidad que tienen los niveles de ácido desoxirribonucleico libre circulante mitocondrial y nuclear urinario para discriminar muestras de sujetos con nefritis lúpica

Navarro, ElkinNavarro, RobertoMárquez Escobar, Olga Cecilia2022-08-012022-08-012022https://hdl.handle.net/20.500.12442/10436El lupus eritematoso sistémico (LES), es una enfermedad autoinmune, proclive a una presentación clínica heterogénea que debuta de manera silente en casos de nefritis lúpica activa (NLA), lo cual es mandatorio de una biopsia renal percutánea con consecuentes eventos adversos. Objetivo: Evaluar la capacidad que tienen los niveles de ADN libre circulante mitocondrial y nuclear urinario (uADN-lc) para discriminar muestras de sujetos con nefritis lúpica activa (NLA). Sujetos y Métodos: Se tomaron muestras de orina de (74) sujetos, (25) con LES sin compromiso renal, (12) con NLA (12) con NLR y (25) Controles sanos. Se realizó una reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real (qPCR) para la cuantificación de las moléculas de ácido desoxirribonucleico libre circulante (ADN-lc), mediante el empleo de genes constitutivos ND1 (mitocondrial) y GAPDH (nuclear), a posteriori de su extracción urinaria (uADN-lc), mediante el Kit Comercial de Aislamiento con Perlas Magnéticas (Applied Biosystems), y la determinación de su concentración con espectrofotómetro (Nanodrop One 2000 de Thermo Scientific ®) y analizador de imágenes.Systemic lupus erythematous (SLE) is an autoimmune disease, prone to a heterogeneous clinical presentation that debuts silently in cases of active lupus nephritis (ALN), which is mandatory for a percutaneous renal biopsy with consequent adverse events. Objective: To evaluate the ability of mitochondrial and nuclear urinary cell-free DNA (cf-uDNA) levels to discriminate samples from subjects with active lupus nephritis (ALN). Subjects and Methods: Urine samples were taken from (74) subjects, (25) with SLE without kidney failure, (12) with (ALN), (12) with (RLN) and (25) Healthy Controls. A quantitative real-time polymerase chain reaction (Q-PCR) was performed for cell-free deoxyribonucleic acid molecule quantification (cf-DNA), using constitutive genes ND1 (mitochondrial) and GAPDH (nuclear), after their urinary extraction (cf-uDNA), by means of the Commercial Isolation Kit with Magnetic Pearls (Applied Biosystems), and its concentration measurement with spectrophotometer (Nanodrop One 2000 de Thermo Scientific ®) and image analyzer.pdfspaAttribution-NonCommercial-NoDerivatives 4.0 InternacionalComplejos inmunesConcentración de ácido desoxirribonucleico libre circulante urinario (uADN-lc)GAPDHSLEDAISLICCND1Nefritis lúpica activa (NLA)Concentration of urinary circulating free deoxyribonucleic acid (uDNA-lc)Active lupus nephritis (ANL)Evaluación de la capacidad que tienen los niveles de ácido desoxirribonucleico libre circulante mitocondrial y nuclear urinario para discriminar muestras de sujetos con nefritis lúpicainfo:eu-repo/semantics/restrictedAccessinfo:eu-repo/semantics/masterThesisAssessment of the ability of mitochondrial and nuclear urinary cell free circulating deoxyribonucleic acid levels to discriminate samples from subjects with Lupus Nephritis